1、,PIVAS环境洁净度的监测,刘馨2018月1月12日,建立与环境监测,环境监测项目,沉降菌检测,沉降菌检测基本术语,沉降菌：用沉降法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。,沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以CFU/皿表示。,沉降菌检测基本术语,空态：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，但是没有生产设备、原材料或人员的状态,沉降菌检测基本术语,静态a：洁净室（区）在洁净空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，生产工艺设备已安装、洁净室（区）内没有生产人员的状态。,沉降菌检测基本术语,静态b：洁
2、净室（区）在生产操作全部结束，生产操作人员撤离现场并经过20min自净后。,沉降菌检测基本术语,动态：洁净室（区）已处于正常生产状态，设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作。,培养皿培养基,恒温培养箱,高压蒸汽灭菌器,培养皿：一般采用 DIAM.90mmH15mm规格的培养皿。培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或沙氏培养基（SDA）或用户认可并经验证明的培养基。,沉降菌检测仪器耗材,沉降菌检测 测定条件,温度控制在1826，相对湿度控制在45%65%；室内送风量或风速的测试，或压差的测试；高效过滤器的泄漏测试。,沉降菌检测 测定规则测试状态,静态和动态两种状态均可进行测试。静
3、态测试时，室内测试人员不得多于两人。沉降菌测试前，被测洁净室由使用者决定是否需要预先消毒。静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4h。,沉降菌检测 测定规则测试时间,在空态或静态a测试时，对单向流洁净室，测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始；对非单向流洁净室，测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。在静态b测试时，对单向流洁净室，测试宜在配置操作人员撤离现场并经过10min自净后开始；对非单向流洁净室，测试宜在配置操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。在动态测试时，则须记录生产开始的时间以及测试时间。,沉降
4、菌检测 测定方法,细菌室领取培养皿，培养皿必须倒置放。,沉降菌检测 测试方法,装培养皿的筐包括培养时所要接触培养皿的物件用酒精擦拭消毒。,沉降菌检测 测试方法,写好消毒灭菌检测单,沉降菌检测 测试方法,将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养皿表面暴露在空气中。,最少采样点数目,100级洁净台，面积指的是送风口面积,采样方法 采样点数量及其布置,采样点的位置离地面0.81.5m左右采样次数每个采样点一般采样一次,！结束时从一更往二更洁净室收取收取后确认个数，并倒置送回细菌室培养，检测单交给细菌室。,采样注意事项,（1）对于单向流洁净室（区）或送风口，采样器
5、采样口朝向应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区），采样口向上。（2）布置采样点时，至少应尽量避开尘粒较集中的回风口。（3）采样时，测试人员应站在采样口的下风测，并尽量少活动。（4）培养皿在用于检测时，为避免培养皿运输或搬运过程造成的影响，宜同时进行对照试验，每次或每个区域取一个对照皿，与采样同法操作但不需要暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入箱内培养，结果应无菌落生长。,菌落培养,（1）全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。（2）采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配制的培养皿经采样后，在3035培养箱中培养，时间不少于2天，采用沙氏培养基（）配制的培养皿经采样后，在培养箱中培养，时间不少于天。（）每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定只培养皿作对照培养。,沉降菌检测结果的记录和判定结果评定,在静态测试时，若某洁净室（区）内的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。注意事项（）测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。（）采取一切措施防止对样本的污染。（）采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。,结果计算,M=(M1+M2+M3+Mn)/n,沉降菌技术要求,！,
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