萝卜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4500-2025.pdf

1、萝卜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4500-2025讲解了利用简单重复序列（SSR）分子标记技术对萝卜（Raphanus sativus L.）品种进行DNA水平鉴定的标准化方法。该标准详细规定了术语定义、缩略语、技术原理、仪器试剂、溶液配制、引物信息、参照品种使用、操作流程及结果判定等内容。其核心技术原理基于不同萝卜品种在基因组SSR位点上的重复次数存在差异，通过PCR扩增和电泳检测实现品种间遗传差异的识别。文件明确了DNA提取推荐方法，包括使用CTAB法从种子或幼嫩组织中提取高质量DNA，并要求O D 260/O D 280比值在1.82.0之间以确保核酸纯度。PCR反应体系与扩增程序被

2、具体化，包含缓冲液、dNTPs、Taq酶、上下游引物及模板DNA的用量与反应热循环参数，同时支持根据设备与试剂情况进行优化调整。电泳检测部分详述了变性聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）的制备流程，涉及玻璃板处理、硅烷化涂层应用、凝胶灌注与聚合等步骤，保障分离分辨率。标准还区分了普通引物与荧光标记引物的应用场景，适用于不同检测平台，并允许采用序贯检测策略，在获得足够位点差异后终止实验，提升效率。此外，提供了配套附录，涵盖主要设备与试剂清单、常用溶液配方、SSR引物序列及其相关信息、参照品种资料和引物分组建议，增强了方法的可操作性和规范性。萝卜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4500-2025适用于从事萝卜种质资源管理、植物新品种保护、种子质量监管、品种审定与登记、育种研发以及农产品检验检测等相关领域的机构与技术人员。该标准特别适用于农业科研单位、种子公司、第三方检测实验室、海关及植物检疫部门在进行萝卜品种真实性鉴定、纯度检测、知识产权保护和市场监督执法时使用。同时，对于参与国家或区域品种试验、DUS测试（特异性、一致性、稳定性测试）和MUS测试（分子一致性测试）的技术人员也具有重要指导意义。高校及科研院所中从事分子生物学、作物遗传育种教学与研究的人员亦可参考本文件开展相关实验工作，确保数据可比性和方法规范化。