秋水仙素诱导大蒜四倍体技术规程TSAASS 282-2025.pdf

1、秋水仙素诱导大蒜四倍体技术规程讲解了利用秋水仙素处理大蒜茎尖以创制四倍体新种质的完整技术流程，涵盖了从材料准备到移栽成活的各个环节。该规程明确了适用于大蒜多倍体育种的技术路径，重点包括茎尖外植体的选取与消毒、培养基配制、秋水仙素处理条件及安全操作规范。在材料准备阶段，推荐使用B5基本培养基添加适量植物生长调节剂，并对鳞芽进行严格的去皮和无菌处理，在解剖镜下剥离出直径约0.2 mm且带有1至3个叶原基的茎尖作为外植体。培养环境要求温度控制在232，光照强度为2531 mol/m/s，光周期维持在1216小时每日。秋水仙素溶液需配制成0.5%0.6%浓度，经过滤灭菌后直接滴加于萌动茎尖，持续处理7

2、2至120小时，之后用无菌水充分清洗并转入正常培养基继续培养。规程强调了秋水仙素的操作安全性，要求佩戴防护装备，并按照国家标准处理废弃化学品。处理后的茎尖在无激素培养基中发育成苗，待苗长至45 cm时转入含低浓度6-BA和NAA的生根培养基诱导生根。倍性鉴定可通过根尖染色体计数或叶片流式细胞仪分析完成，确保获得稳定的四倍体植株。最后阶段为炼苗与移栽，通过逐步开放培养容器实现环境适应，再将健壮试管苗移栽至符合NY/T 2118标准的育苗基质中，实行单株编号管理，便于后续追踪与选育。整个技术体系科学严谨，具有可操作性和重复性，为大蒜遗传改良提供了标准化支撑。秋水仙素诱导大蒜四倍体技术规程适用于从事大蒜遗传育种、生物技术研究以及蔬菜种质资源创新的相关科研机构、农业高等院校、种业企业和农业科技推广单位。该规程特别适用于开展多倍体育种工作的实验室和技术人员，可用于大蒜优良品种的选育、基因功能研究、细胞遗传学分析以及新型园艺性状的创制。同时，也适用于承担农作物生物技术创新项目的技术人员参考执行，尤其适合在组织培养条件下进行作物遗传改良的从业者应用。通过对秋水仙素处理参数、培养条件和倍性鉴定方法的规范化，本规程有助于提升大蒜多倍体诱导的成功率和实验结果的一致性，推动大蒜育种技术的标准化与产业化发展。