犬贫血相关六种病原体实时荧光RAA检测方法TCVMA 381-2026.docx

1、犬贫血相关六种病原体实时荧光RAA检测方法TCVMA 381-2026讲解了针对犬巴贝斯焦虫、吉氏巴贝斯虫、犬支原体、犬嗜吞噬细胞无浆体、犬肝簇虫和犬埃里希氏体六类明确导致犬贫血的病原体所建立的标准型实时荧光重组酶介导链替换核酸扩增（RAA）定性检测技术体系。该标准详细规定了从样本采集、运输与保存，到核酸提取、引物探针设计、反应体系构建、恒温荧光扩增操作及结果判读的全流程技术要求，涵盖CTAB法核酸提取缓冲液与PBS缓冲液等关键试剂配制方法，明确列出了各病原体特异性引物与FAM/BHQ1标记探针序列（见附录B、C），并配套规范了阳性对照（含六种病原体靶标片段的质粒或灭活菌液）与阴性对照（已知六

2、项阴性的犬全血）的制备与使用方式。标准同时明确了所需仪器设备清单，包括恒温荧光检测仪、冷冻高速离心机、超微量分光光度计、微量移液器及金属浴等，强调全程符合GB 19489生物安全通用要求和GB/T 27401兽医学检测质量控制规范。该方法具备恒温（39）、快速（20分钟）、高特异性和高灵敏度特点，不依赖复杂热循环设备，适用于基层实验室及现场快检场景，为犬贫血病因诊断提供了统一、可复现、易推广的技术依据。犬贫血相关六种病原体实时荧光RAA检测方法TCVMA 381-2026适用于动物疫病预防控制机构、宠物诊疗机构、第三方动物医学检测实验室、高校及科研院所兽医临床实验室、海关及边境动物检疫单位等从事犬类传染病检测与诊断的技术人员；适用于需要开展犬贫血病原学筛查、鉴别诊断、流行病学调查及临床治疗效果评估的相关岗位，尤其适合缺乏PCR仪但具备基础分子生物学操作能力的中小型兽医实验室。本标准亦可作为兽医继续教育、检测人员上岗培训、实验室能力验证及方法比对的技术参考文件，对提升我国犬传染性贫血疾病早期识别率、精准防控水平和生物安全风险应对能力具有直接支撑作用。