农业农村部公告第611号-3-2022 硫酸新霉素可溶性粉中非法添加苯并咪唑和大环内酯类抗寄生虫药物检查方法.pdf

1、5附件 3硫酸新霉素可溶性粉中非法添加苯并咪唑和大环内酯类抗寄生虫药物检查方法1 适适用用范范围围1.1 本方法适用于硫酸新霉素可溶性粉中非法添加氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑、三氯苯达唑、乙酰氨基阿维菌素、阿维菌素、伊维菌素的检查。1.2 用于其他兽药制剂中非法添加氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑、三氯苯达唑、乙酰氨基阿维菌素、阿维菌素、伊维菌素检查时，需进行空白试验和检测限测定。2 检检查查方方法法照高效液相色谱法（中国兽药典一部附录 0512）测定。色谱条件与系统适用性用十八烷基键合硅胶为填充剂（Diamonsil C184.6mm250mm，5m，或其他等效的色谱柱）；以水为流动相 A，

2、以乙腈为流动相 B，流速为每分钟 1.0ml，按下表进行线性梯度洗脱；二极管阵列检测器，采集波长范围为 200nm400nm，分辨率为 1.2nm，记录 245nm 波长处的色谱图。取乙酰氨基阿维菌素与阿维菌素对照品适量，加含 1%冰醋酸的甲醇溶解制成每 1ml 中各含 0.1mg 的混合溶液，作为系统适用性溶液。取 10l 注入液相色谱仪，记录色谱图和光谱图。乙酰氨基阿维菌素和阿维菌素之间的分离6度应符合要求。时间（分钟）流动相 A（%）流动相 B（%）070302703016307021307021.5158526158526.5128830128830.57030357030测定法取供试

3、品 0.1g，置 10ml 量瓶中，加含 1%冰醋酸的甲醇8ml，超声处理 10 分钟，用含 1%冰醋酸的甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑、三氯苯达唑、乙酰氨基阿维菌素、伊维菌素与阿维菌素对照品适量，用含 1%冰醋酸的甲醇溶解并稀释制成每 1ml 中各含 0.1mg 的混合溶液（必要时超声处理使溶解），作为对照品溶液。取供试品和对照品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，同时记录色谱图和光谱图。通过与对照品溶液色谱图相应对照品保留时间和光谱图比对，确定供试品中是否含有氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑、三氯苯达唑、乙酰氨基阿维菌素、阿维菌素和伊维菌素。3 结结果

4、果判判定定3.1 供试品溶液色谱图中如出现与对照品溶液中相应对照品保留时间一致的色谱峰（差异小于等于5%），且为单一物质峰；在规定的采集波长范围内，两者紫外光谱图匹配，且最大吸收波长一致（差7异小于等于2nm），判定为检出氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑、三氯苯达唑、乙酰氨基阿维菌素、阿维菌素或伊维菌素。3.2 供试品溶液色谱图中如出现与相应对照品保留时间一致的色谱峰，但峰面积小于检测限峰面积，判定为未检出氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑、三氯苯达唑、乙酰氨基阿维菌素、阿维菌素或伊维菌素。4 检检测测限限本方法中氧阿苯达唑、阿苯达唑、芬苯达唑和三氯苯达唑的检测限均为 0.05g/kg，乙酰氨基阿维菌素、阿维菌素和伊维菌素的检测限均为 0.3g/kg。注：所用冰醋酸为色谱级。附图 1：色谱图8附图 2：光谱图氧阿苯达唑阿苯达唑9芬苯达唑三氯苯达唑乙酰氨基阿维菌素阿维菌素伊维菌素