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藏猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR 检测技术规范DB54T0450-2025.pdf

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藏猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR 检测技术规范DB54T0450-2025.pdf

藏猪流行性腹泻病毒荧光定量 RT-PCR 检测技术规范讲解了针对藏猪流行性腹泻病毒（PEDV）的检测标准流程，涵盖了检测所需的所有技术环节。文档详细描述了适用的仪器设备，包括荧光定量PCR仪、高压灭菌锅、生物安全柜等关键仪器，并对试剂和耗材进行了明确要求，强调所有试剂必须为分析纯并防止RNA酶污染。该规范指定了样品采集、处理和保存的详细流程，涵盖粪便、肠道内容物及组织样品的采集方法与保存条件。在检测方法上，文件对RNA提取步骤、逆转录反应、荧光定量PCR反应体系及程序做了明确规定。在质量控制方面，规范强调通过设定循环阈值（Ct值）来进行检测结果的判定，并详细列出了生物安全措施，包括操作过程中的安全防护和废弃物处理办法。文档还包括多个附录，分别给出了试剂的配置方法、引物与探针序列以及PCR反应条件。藏猪流行性腹泻病毒荧光定量 RT-PCR 检测技术规范适用于兽医检测机构、动物防疫部门、科研机构及生猪养殖企业，特别是藏猪养殖地区或有流行性腹泻疫情防控需求的相关单位。同时适用于从事动物疫病诊断、病原检测及分子生物学研究的技术人员和相关实验室，能够为猪流行性腹泻病毒的快速、准确检测提供统一的标准化流程，对于控制PED疫情传播、保障畜牧业健康发展具有重要作用。