1、动物源副猪嗜血杆菌分离与鉴定技术规程NYT4658-2025讲解了副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis）从动物样本中进行科学、规范分离与鉴定的完整技术流程，描述了该病原菌在实验室条件下开展监测工作的关键操作环节。本规程确立了包括样品采集、运输保存、分离纯化、筛查鉴定、菌种保藏及生物安全管理在内的全过程标准化程序。文件明确了适用于猪鼻腔拭子、肺脏、心包液、胸腔积液、腹腔积液、关节液和脑脊液等多类临床样本的处理方法，并详细规定了使用TSA培养基配合NAD和胎牛血清进行细菌分离的条件。针对可疑菌落，提供了形态学观察、卫星生长试验等初步筛查手段，并提出可采用生化鉴定、PCR、荧光定量
2、PCR或MALDI-TOF MS质谱分析四种方式之一完成最终鉴定。文件还列出了PCR和qPCR的具体引物序列、反应体系组成与扩增条件，强调扩增产物需通过测序比对确认，相似度不低于98.0%方可判定为阳性。此外，对实验所用试剂、培养基配制、仪器设备要求以及标准菌株的使用均作出明确规定，确保检测结果的准确性和可重复性。整个规程充分参考了国内外相关标准，结合我国动物源细菌耐药性监测的实际需求，体现了技术先进性与实践适用性的统一。动物源副猪嗜血杆菌分离与鉴定技术规程NYT4658-2025适用于从事兽医微生物检测、动物疫病防控、畜禽养殖健康管理以及兽药残留与耐药性监测的相关机构和技术人员。该规程广泛适用于各级动物疫病预防控制中心、兽医实验室、科研院校、动物医院及生猪养殖企业内部检测部门，在开展副猪嗜血杆菌引起的猪传染性胸膜肺炎等相关疾病的诊断、流行病学调查和耐药性研究时具有重要指导意义。同时，该技术规程也可作为动物源性细菌检测标准化建设、实验室资质认定和质量控制的技术依据，对于提升我国动物源致病菌监测能力、促进畜牧业健康发展和保障动物源食品安全具有重要作用。
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