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南美白对虾5种病原快速检测 重组酶聚合酶扩增微流控芯片法T∕ZJSC 0021-2025.docx

1、南美白对虾5种病原快速检测 重组酶聚合酶扩增微流控芯片法讲解了针对南美白对虾五大关键病原体急性肝胰腺坏死病致病弧菌(VAHPND)、白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)、对虾十足目虹彩病毒(SHIV)和虾肝肠胞虫(EHP)建立的一套标准化、高特异性、恒温核酸快速检测方法。该标准详细描述了以重组酶聚合酶扩增(RPA)技术为核心,集成微流控芯片平台的检测原理与操作流程,明确各病原对应的特异性引物与荧光淬灭探针设计原则,规定了芯片结构(48离心式、单池5 L容量)、试剂配制要求(含冻干RPA酶混合体系、内参质粒预置、阴阳性对照设置)、核酸提取规范及生物安全执行依据。

2、标准强调检测全过程在3742恒温条件下完成,无需热循环设备,扩增结果通过荧光信号动力学曲线(阈值时间、荧光上升斜率)进行可视化判读,显著提升现场检测时效性与可重复性。同时明确了该方法适用的范围边界、规范性引用文件体系以及实验室质量控制与生物安全等级要求,为基层水产疫病防控提供了可落地、可验证、可监管的技术支撑。南美白对虾5种病原快速检测 重组酶聚合酶扩增微流控芯片法适用于各级水产技术推广机构、水生动物疫病预防控制中心、水产科研院所、第三方检测实验室、规模化对虾养殖场及苗种生产企业等从事南美白对虾健康养殖、疫病监测、产地检疫和流通监管的相关技术人员。该标准所确立的方法尤其适用于需要在非PCR实验室条件下开展现场快检的场景,如渔港码头、育苗车间、活鲜交易市场及移动检测车等基础设施有限但对响应速度要求高的场所。同时,标准中关于微流控芯片预置试剂、内参质粒设计及恒温扩增的操作规范,亦可为其他水生经济动物(如罗氏沼虾、青蟹等)同类病原检测方法的开发与标准化提供技术参考与路径借鉴,具有较强的行业普适性与技术延展性。

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