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大黄鱼5种细菌性病原快速检测 环介导等温扩增微流控芯片法T∕ZJSC 0022-2025.docx

1、大黄鱼5种细菌性病原快速检测 环介导等温扩增微流控芯片法讲解了针对大黄鱼养殖中高发的五种致病细菌变形假单胞菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌和恶臭假单胞菌,建立的一种集环介导等温扩增(LAMP)技术与微流控芯片于一体的标准化快速检测方法。该标准系统规定了检测原理、所需材料与试剂、仪器设备配置、具体操作流程、结果判读规则及生物安全要求,明确了以gyrB、ompK、vhA、TL和oprD基因为靶标设计LAMP引物并预包埋于48离心式微流控芯片中的技术路径,实现了DNA提取后直接加样、恒温扩增(无需热循环仪)、实时荧光监测及S型曲线自动判读的全流程集成化。标准强调检测体系的特异性、灵敏度与可重复性

2、,配套设置阴性对照、阳性对照和内参对照,确保结果可靠;对核酸提取、反应液配制、芯片封膜、仪器运行参数及实验室生物安全(依据GB 19489)均提出明确技术约束。文件还规范了耗材纯度、试剂等级、水质要求(GB/T 6682一级或二级水)、引物纯化方式(PAGE/HPLC)及设备温控精度(0.1),体现出高度的可操作性与质量控制刚性。大黄鱼5种细菌性病原快速检测 环介导等温扩增微流控芯片法适用于水产养殖企业病害防控一线技术人员、水生动物疫病预防控制机构实验室人员、渔政监督与水产技术推广部门检验人员、高校及科研院所从事鱼类病原分子检测的研究者,以及第三方水产品安全检测实验室的专业技术人员。该标准特别契合大黄鱼主产区(如浙江、福建沿海)规模化养殖场开展病原早期筛查、疫情快速响应与健康管理的需求,亦为其他海水经济鱼类(如鲈鱼、石斑鱼)相关细菌性病原的检测方法开发提供技术参照。同时,标准对微流控芯片设计、LAMP引物验证、恒温扩增系统集成等环节的规范,对生物传感器研发企业、分子诊断试剂盒生产商及基层渔业实验室能力建设具有指导价值。

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