1、鼻疽伯氏菌重组聚合酶恒温扩增(RAA)检测方法TCVMA 368-2026讲解了针对高致病性人兽共患病原体鼻疽伯氏菌的快速、灵敏、特异核酸检测技术标准,系统规定了该RAA方法的适用范围、规范性引用文件、试剂与材料配制要求、仪器设备配置、样本采集与前处理流程、DNA提取操作细节及恒温扩增检测程序。该标准明确了检测对象为马属动物疑似感染个体的鼻分泌液、咳出液、溃疡脓液及血液样本,强调全过程须在符合GB 19489要求的生物安全条件下开展,并严格遵循NY/T 541进行采样与保存。标准详细列出了HP基因靶点的引物探针序列、CTAB法核酸提取关键步骤、FAM荧光标记信号判读阈值及阴/阳性对照设置原则,
2、同时对反应体系组分(含启动剂、RAA荧光反应单元)、恒温扩增温度(39)、时间(2030 min)及结果判定标准作出统一规定,具备可操作性与实验室复现性。标准还特别提示涉及专利风险,由起草单位提供技术支撑,由中国兽医协会归口管理,体现了我国兽医病原分子诊断标准体系的规范化和专业化演进。鼻疽伯氏菌重组聚合酶恒温扩增(RAA)检测方法TCVMA 368-2026适用于各级动物疫病预防控制机构、海关技术中心、出入境检验检疫实验室、高校及科研院所兽医微生物学实验室、第三方检测机构以及规模化马场配套兽医实验室等从事马鼻疽疫情监测、临床诊断、流行病学调查和应急处置的专业技术人员。本标准尤其适用于不具备实时荧光定量PCR仪但配备恒温荧光检测设备的基层实验室,可支持偏远地区或移动检测场景下的快速现场筛查。同时,该标准也为兽用生物制品企业开展鼻疽疫苗效力验证、菌株纯度鉴定及生产过程质控提供核酸检测依据,对保障马属动物养殖业生物安全、防范人兽共患病跨境传播具有明确的行业指导价值。