1、2023?12?22发布2024?05?01实施饲料中二硝托胺的测定46中华人民共和国农业行业标准备案号：XXXX-XXXX65.120CCS B44262023Determination of dinitolmide in feeds中华人民共和国农业农村部发 布代替农业部 783 号公告52006N Y/T 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件代替农业部 号公告 饲料中二硝托胺的测定高效液相色谱法,与农业部 号公告 相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:a)更改了适用范围(见第章,年版的第章);b)增加了高效液相色谱法检
2、出限(见第章);c)增加了液相色谱串联质谱法(见第章);d)更改了称样量和提取方法(见 和 ,年版的 );e)更改了净化方法(见 和 ,年版的 );f)更改了色谱参考条件(见 、和 ,年版的 ).请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由农业农村部畜牧兽医局提出.本文件由全国饲料工业标准化技术委员会(S A C/T C)归口.本文件起草单位:宁波市农产品质量检测中心.本文件主要起草人:王全胜、张亮、吴银良、凌淑萍、付岩、朱勇、应永飞、徐峰.本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:年首次发布为农业部 号公告 ;本次为第一次修订.N Y/T 饲料中二硝托胺
3、的测定范围本文件描述了饲料中二硝托胺的液相色谱串联质谱和高效液相色谱测定方法.本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中二硝托胺的测定.本文件中液相色谱串联质谱法的检出限为 m g/k g、定量限为 m g/k g,高效液相色谱法的检出限为 m g/k g、定量限为 m g/k g.规范性引用文件下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法G B/T 动物饲料试样的制备术语和定义本文件没有需要界定的
4、术语和定义.液相色谱串联质谱法 原理试样经氨化甲醇提取,中性氧化铝固相萃取净化,液相色谱串联质谱仪检测,外标法定量.试剂或材料除非另有规定,仅使用分析纯试剂.水:G B/T ,一级.乙腈:色谱纯.甲醇:色谱纯.甲酸:色谱纯.氨水甲醇溶液:取氨水m L,用甲醇定容至 m L,混匀.甲酸溶液:取甲酸()m L,用水稀释至 m L,混匀.甲酸乙腈溶液:取 甲酸溶液()m L,用乙腈()稀释至 m L,混匀.标准储备溶液(m g/m L):称取二硝托胺标准品(C A S号:,纯度不低于)m g(精确至 m g),置于 m L容量瓶中,用乙腈()溶解并定容,混匀.于 以下保存,有效期个月.标准中间溶液(
5、g/m L):准确移取标准储备溶液()m L,置于 m L容量瓶中,用乙腈()稀释、定容、混匀.于 以下保存,有效期个月.标准系列溶液:准确移取标准中间溶液(),分别用 甲酸溶液()和乙腈()稀释、定容至m L,混匀,配制成浓度分别为n g/m L、n g/m L、n g/m L、n g/m L、n g/m L和 n g/m L的标准系列溶液.临用现配.固相萃取柱:中性氧化铝柱,g/m L,或性能相当者.微孔滤膜:m,有机系.N Y/T 仪器设备 液相色谱串联质谱仪:配电喷雾离子源.离心机:转速不低于 r/m i n.分析天平:感量 m g和 g.振荡器.涡旋混合器.固相萃取装置.可控温氮吹仪
6、.样品按G B/T 的规定制备样品,至少 g,粉碎使其全部通过 mm孔径的分析筛,充分混匀,装入磨口瓶中,保存,备用.试验步骤 提取平行做份试验.称取试样g(浓缩饲料和添加剂预混合饲料为g),精确至 g,置于 m L塑料离心管中,准确加入 m L(浓缩饲料和添加剂预混合饲料为 m L)氨水甲醇溶液(),涡旋 s,振荡提取 m i n,于 r/m i n离心m i n,移取上清液.残渣重复提取次,振荡 m i n,离心后合并上清液.待净化.净化用m L甲醇()活化固相萃取小柱().准确移取m L(浓缩饲料和添加剂预混合饲料为 m L)待净化溶液()过柱,用m L(浓缩饲料和添加剂预混合饲料为m L)甲醇()洗脱,收集洗脱液,用甲醇()定容至 m L(浓缩饲料和添加剂预混合饲料为m L),混匀.准确移取m L于 下用氮气吹干,准确加入 m L甲酸乙腈溶液()溶解残渣,涡旋混匀,微孔滤膜()过滤,备用.测定 液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下:a)色谱柱:C 柱,柱长 mm,内径 mm,粒度 m,或性能相当者;b)柱温:;c)进样量:L;d)流动相:A相为 甲酸溶液();B相为乙腈(),梯
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