淡水生物环境DNA监测技术规范 大型底栖动物DB36T2219-2026.docx

1、淡水生物环境DNA监测技术规范 大型底栖动物讲解了基于环境DNA（eDNA）宏条形码技术开展淡水生态系统中大型底栖动物监测的全流程技术要求，涵盖试剂与器材配置、现场样品采集方法、PCR扩增及引物选择、高通量测序实施路径、生物信息学分析要点，以及贯穿全过程的质量控制与评价指标体系。该规范明确了大型底栖动物的定义范畴，特指无法通过500 m筛网的水底栖息无脊椎动物类群，包括节肢动物门、软体动物门、环节动物门等主要类群；规定了COI基因作为核心条形码靶标序列的技术依据，提出以扩增序列变体（ASV）替代传统操作分类单元（OTU）进行物种识别的先进策略；细化了水体与沉积物两类eDNA来源的采样工具选型（

2、如彼得森采泥器、D形网、柱状采泥器）、抽滤参数、保存条件与核酸提取标准；强调PCR扩增需兼顾特异性与覆盖广度，测序须符合GB/T 30989和GB/T 35537等国家规范，数据质控须涵盖空白对照、重复样本、阳性参考及扩增效率评估；所列质量评价指标包括检出物种数、ASV丰度分布、污染率阈值、序列比对置信度及数据库匹配率等可量化参数，全面支撑监测结果的科学性、可比性与监管适用性。淡水生物环境DNA监测技术规范 大型底栖动物适用于生态环境监测机构、水利水电工程环评单位、流域管理机构、科研院所及第三方检测实验室等从事水生态健康评估与生物多样性调查的专业组织，特别适用于湖泊、水库、河流及地下水等淡水生态系统中大型底栖动物的常态化、网络化与智能化监测工作。该规范为环境管理部门开展水生态考核、生物完整性指数（IBI）构建、外来物种早期预警、珍稀濒危物种分布核实及生态修复成效评估提供标准化eDNA技术支撑，亦可指导高校与科研单位在环境微生物组学、水生生物地理学、气候变化响应研究等方向开展方法统一、数据可溯源的野外与实验协同工作，同时满足地方生态环境标准体系建设与长江经济带、鄱阳湖流域等重点区域水生态保护修复行动的技术落地需求。