饮用水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的核酸检测 重组酶介导等温核酸扩增法DB32T5362-2026.pdf

1、饮用水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的核酸检测 重组酶介导等温核酸扩增法DB32T5362-2026讲解了以重组酶介导等温核酸扩增（RAA）技术为核心，对饮用水中两种关键水源性致病原虫隐孢子虫（Cryptosporidium）和蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia）进行高灵敏、快速、现场适配型核酸检测的标准化方法。该标准详细描述了从水样富集、核酸提取到特异性扩增检测的全链条操作流程，明确界定隐孢子虫卵囊与蓝氏贾第鞭毛虫包囊作为感染性形态在饮用水中的风险属性，并阐明其致病机制与公共卫生意义。文件系统规定了适用的仪器设备，包括滤膜过滤富集装置、恒温水浴锅、超声破碎仪、RAA恒温荧光检测仪（需

2、兼容FAM/HEX双通道）及配套移液系统；列明了组织核酸提取试剂盒、乙酸镁溶液、特异性引物与探针序列（靶向隐孢子虫18S rRNA基因与蓝氏贾第鞭毛虫giardin基因），并给出附录形式的规范性反应体系配方与引物设计依据。方法强调全流程质控要求，明确阳性对照（加标水样）与阴性对照（试验用水）设置原则，限定样本运输须保持04冷藏，且富集后24小时内须完成核酸提取与扩增检测，确保结果可靠性。整个技术路径可在39恒温条件下于15分钟内完成靶标扩增与荧光判读，突破传统PCR对热循环仪的依赖，显著提升基层单位与应急场景下的检测响应能力。饮用水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的核酸检测 重组酶介导等温核酸扩增法

3、DB32T5362-2026适用于各级疾病预防控制机构、卫生健康监督执法部门、城市供水企业水质检验中心、第三方水质检测实验室以及应急保障与环境监测单位的技术人员。该标准特别适配于自来水厂出厂水与管网末梢水的常态化卫生监测、突发性水源性腹泻疫情溯源调查、农村分散式供水安全评估、重大活动饮用水保障专项检测等实践场景。因RAA技术无需精密温控循环设备、操作步骤简化、检测周期短（2小时），亦可延伸应用于基层疾控站、县级卫生检验室及移动检测平台等基础设施相对有限但需快速响应的现场作业单位。同时，该标准为涉水产品监管、水源地风险预警及生活饮用水卫生标准（GB 5749）中微生物指标的风险管控提供了一套可验证、可复现、可监管的分子生物学补充技术支撑。