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饮用水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的核酸检测 重组酶介导等温核酸扩增法DB32T5362-2026.docx

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资源描述

1、饮用水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的核酸检测 重组酶介导等温核酸扩增法DB32T5362-2026讲解了以重组酶介导等温核酸扩增(RAA)技术为核心,针对饮用水中两种关键水源性寄生虫隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫开展快速、灵敏、特异性核酸检测的标准化方法。该标准明确了检测适用范围为出厂水与末梢水,系统规定了从水样富集、核酸提取到靶标扩增及结果判读的全过程技术要求。标准详细列出了所需仪器设备,包括1m2m孔径PP滤膜过滤装置、恒温水浴锅、超声破碎仪、391恒温荧光RAA检测仪(须兼容FAM与HEX双通道),以及配套移液器与离心设备;同时规范了试剂材料,涵盖组织核酸提取试剂盒、乙酸镁溶液、高纯度实验用水(

2、符合GB/T 6682一级水要求),并指定了靶向隐孢子虫18S rRNA基因与蓝氏贾第鞭毛虫-giardin基因的特异性引物及探针序列(载于附录B)。其技术原理依托RAA体系在39恒温下515分钟内完成靶序列高效扩增,规避传统PCR对热循环仪的依赖,显著提升现场检测可行性与基层应用适配性。标准还设定了严谨的结果判定规则,明确阳性、阴性与无效反应的荧光阈值与曲线形态依据,并通过附录A、C提供RAA基础反应体系配制方案与完整扩增体系组分表,确保方法可重复、可验证、可溯源。饮用水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的核酸检测 重组酶介导等温核酸扩增法DB32T5362-2026适用于各级疾病预防控制机构、卫生监督所、城市供水水质监测站、自来水厂水质检验室、环境监测站及第三方水质检测实验室等从事生活饮用水微生物安全风险监测与应急检测的技术人员。本标准特别适配基层检测单位对隐孢子虫与蓝氏贾第鞭毛虫这两类耐氯性强、常规消毒难以有效灭活且易引发大规模水源性腹泻暴发的病原体开展快速初筛与确证检测的需求,亦可用于突发公共卫生事件中涉水疫情的早期识别与响应。同时,该标准为高校、科研院所开展相关病原体分子流行病学研究、方法学比对及现场便携式检测装备开发提供了权威技术依据,对强化饮用水全链条生物风险防控能力、支撑生活饮用水卫生标准(GB 5749)实施及地方水质监管精细化具有直接指导价值。

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