1、 附件 化 妆 品 补 充 检 验 方 法 BJH 202205 化妆品中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的测定 2022-12-20 发布 国 家 药 品 监 督 管 理 局 发 布 BJH 化妆品中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的测定（BJH 202205）1 范围 本方法规定了化妆品中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的测定方法。本方法适用于膏霜乳类、液体类、凝胶类、贴膜类化妆品中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的定性和定量测定。2 原理 样品经甲醇超声提取，采用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性，定量离子对峰面积定量，以标准曲线法计算含量。3 试剂和材料 除另有规定外，本方法
2、中所用试剂均为分析纯及以上规格，水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。3.1 甲醇，色谱纯。3.2 冰乙酸，色谱纯。3.3 0.1%乙酸溶液：量取 1 mL 冰乙酸（3.2），用水稀释至 1000 mL，混匀。3.4 标准品：脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准品，纯度97%。标准品的中文名称、英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量、结构式详见附录 A 中的表 A.1。3.5 脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准储备溶液：称取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准品 20mg（精确到 0.00001g），置于 50mL 容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容至刻度，摇匀。该标准储备溶液的质量浓度为 400mg/
3、L。3.6 脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准溶液：精密量取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准储备溶液（3.5）0.20mL，置于 50mL 容量瓶中，用甲醇（3.1）定容至刻度，摇匀。该标准溶液的质量浓度为 1.6mg/L。4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。4.2 分析天平：感量 0.0001g 和 0.00001g。4.3 超声波清洗器。4.4 涡旋混合仪。4.5 高速离心机，转速不小于 10000r/min。5 试样制备与保存 样品应按照标签标示的贮存条件进行保存。取样前，应检查封口的完整性，观察样品的性状和特征，并使样品混匀。打开包装后，应尽可能快地取出所要测定部分进行分
4、析，取样后，应将样品进行密封保存。6 分析步骤 6.1 筛查用标准溶液 量取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准溶液（3.6）适量，用甲醇（3.1）进行稀释，配制成浓度为2 g/L的标准溶液。6.2 基质标准中间液 精密量取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯标准溶液（3.6）10mL，置于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀释至刻度，摇匀，制成脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯浓度为160 g/L的基质标准中间液。6.3 基质标准系列溶液 称取空白试样0.2g（精确到0.0001g），置于25mL具塞比色管中，精密加入基质标准中间液（6.2）适量，加入甲醇（3.1）至约20mL，自“涡旋振荡30s”起与样品同法处理（6
5、.4），配制得浓度为1、2、5、12.5、25 g/L系列浓度基质标准系列溶液。注：基质标准系列溶液采用的空白试样的剂型应与待测样品基本一致。6.4 样品处理 称取样品0.2g（精确到0.0001g），置于25mL具塞比色管中，加入甲醇（3.1）约20mL，涡旋振荡30s，使试样与提取溶剂充分混匀，超声提取20min，静置至室温，用甲醇（3.1）定容至刻度，摇匀，经0.22 m聚四氟乙烯滤膜过滤（必要时可先10000r/min转速离心10min），滤液作为供试品溶液备用。当供试品溶液中检出脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯且浓度较高时，需适当稀释后测定；空白试样（6.3）也应同法稀释。6.5 仪器参考条
6、件 6.5.1 色谱条件 色谱柱：C18柱（100mm2.1mm，1.8 m），或等效色谱柱；流动相：A 为 0.1%乙酸溶液（3.3），B 为甲醇（3.1）。梯度洗脱程序见表 1；流速：0.2mL/min；柱温：35；进样量：2 L。表 1 梯度洗脱程序 时间（min）流动相 A（%）流动相 B（%）0.00 85 15 10.00 10 90 12.00 10 90 13.00 85 15 16.00 85 15 6.5.2 质谱条件 离子源：电喷雾离子源（ESI 源）；监测模式：负离子多反应监测模式（MRM），监测离子对及相关参数设定见表 2。表 2 脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯监测离子对及相关参数设定 组分名称 母离子（m/z）子离子（m/z）CE（eV）脱水穿心莲内酯 琥珀酸半酯 531.2 98.9*431.1-50-19*为推荐的定量离子。注：当采用不同质谱仪器时，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。6.6 定性判定 取供试品溶液（6.4）与筛查用标准溶液（6.1）在相同分析条件下测定，样品中如呈现定量离子对和定性离子对的色谱峰，被测成分的特征离子峰保留时间与
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