1、2023?04?11发布2023?08?01实施植物源性食品中抗性淀粉的测定分光光度法04中华人民共和国农业行业标准备案号：XXXX-XXXX65.020.01CCS B43582023Determination of resistant starch in foods of plant origin byspectrophotometry method中华人民共和国农业农村部发 布N Y/T 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出
2、.本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口.本文件起草单位:北京市营养源研究所有限公司、农业农村部食物与营养发展研究所、内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司、北京东方倍力营养科技有限公司、中国合格评定国家认可委员会、北京工商大学、北京市农林科学院农产品加工与食品营养研究所、大连工业大学、北京林业大学、安徽燕之坊食品有限公司、南京西麦大健康科技有限公司、华南理工大学、荃银祥玉(北京)生物科技有限公司、北京植本乐食品科技有限公司.本文件主要起草人:崔亚娟、朱大洲、赵笑、孔凡华、杨春雪、白沙沙、刘玉峰、马利军、张慧萍、贺月恩、蒋峰、蒋彤、李宏、李赫、刘光敏、杜明、杨清、孟冬、安琪、刘井山、李璐、
3、司琳媛、刘锐、张斌、李建华、王姝媛.N Y/T 植物源性食品中抗性淀粉的测定分光光度法范围本文件规定了植物源性食品中抗性淀粉的分光光度测定方法.本文件适用于植物源性食品中抗性淀粉含量(g/g g/g)的测定.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理猪胰腺 淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶将试样中非抗性淀粉酶解为葡萄糖,经乙醇洗涤,离心后得到粗抗性淀粉,氢氧化钾溶液
4、将其溶解,加入淀粉葡萄糖苷酶将粗抗性淀粉酶解为葡萄糖,与葡萄糖氧化酶过氧化物缩合生成红色醌类化合物,在 n m处测其吸光度;吸光度值与抗性淀粉含量成正比.试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T 规定的一级水.试剂 氢氧化钠(N a OH).氢氧化钾(KOH).二水合氯化钙(C a C l HO).磷酸二氢钾(KHP O).盐酸(HC l).马来酸(CHO).氨基安替比林(CHNO).对羟基苯甲酸(CHO).无水乙醇(CHCHOH).冰乙酸(CHC OOH).猪胰腺 淀粉酶:C A S ,U/m g,冰箱储存.淀粉葡萄糖苷酶:C A S ,U/m L,储存.葡萄糖氧化酶
5、:C A S ,U/m g,储存.过氧化物酶:C A S ,U/m g,储存.试剂配制 m o l/L氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠()g,缓慢加入 m L水,溶解后加水稀释至N Y/T m L,混匀.m o l/L氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠()g,缓慢加入 m L水,溶解后加水稀释至 m L,混匀.m o l/L氢氧化钾溶液:称取氢氧化钾()g,缓慢加入 m L水,溶解后加水稀释至 m L,混匀.m o l/L盐酸溶液:量取盐酸()m L,缓慢加入 m L水中,混合均匀后加水稀释至 m L.mm o l/L马来酸钠缓冲液:称取马来酸()g溶于 m L水中,用m o l/L氢氧化钠溶液()调至p
6、H ,再加入二水合氯化钙()g,加水稀释至 m L.m o l/L乙酸钠缓冲液:量取冰乙酸()m L至 m L水中,用m o l/L氢氧化钠溶液()调至p H ,加入稀释定容至 m L.mm o l/L乙酸钠缓冲液:吸取冰乙酸()u L至 m L水中,用m o l/L氢氧化钠溶液()调至p H ,加入稀释定容至 m L.乙醇溶液:量取无水乙醇()m L,用水稀释并定容至 m L,混匀.U/m L淀粉葡萄糖苷酶储备液:吸取淀粉葡萄糖苷酶()m L用马来酸钠缓冲液()稀释至 m L,分装于聚丙烯塑料管,放于 保存.混合酶溶液 猪胰腺 淀粉酶(U/m L)淀粉葡萄糖苷酶(U/m L):称取猪胰腺 淀粉酶()g溶于 m L马来酸钠缓冲液()中,搅拌m i n.加入淀粉葡萄糖苷酶 m L使用液(),混匀后,r/m i n离心 m i n,取上清液.现用现配.GO P O D 氨基安替比林储备液:称取磷酸二氢钾()g、氢氧化钠()g和对羟基苯甲酸 g()至 m L水中溶解,混匀,用盐酸溶液()或m o l/L氢氧化钠()溶液调节溶液至p H ,加水稀释定容至 m L.GO P O D 氨基 安 替
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