1、ICS 65.020 B 15 DB13 河北省地方标准 DB13/T 17312013 西瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规范 Identification rule of resistance to fusarium oxysporum f.sp.niveum on watermelon seedling 2013-05-27 发布 2013-06-15 实施 河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 17312013 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规定起草。本标准由河北省农林科学院提出。本标准起草单位：河北省农林科学院植物保护研究所。本标准主要起草人：孔令晓、纪莉景、王连
2、生、栗秋生、王翠霞。DB13/T 17312013 1 西瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了西瓜抗枯萎病苗期鉴定的术语和定义、苗期抗性鉴定方法、抗性标准和评价报告。本标准适用于西瓜品种（系）和种质资源对枯萎病苗期抗性鉴定。2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）适用于本标准。NY/T 5111-2002 无公害食品 西瓜生产技术规程 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 苗期抗性鉴定 指利用接种体在西瓜种植之前在土壤中进行接种，出苗后通过幼苗
3、发病率来评价品种（系）对枯萎病的抗病性。3.2 土壤夹心接种法 指土壤接种病原菌的一种方法，首先在营养钵底部加入一层灭菌基质，再加入一层混有一定浓度接种体的基质，播种后再覆盖一层灭菌基质。4 苗期抗性鉴定方法 4.1 对照品种的选择 选择对西瓜枯萎病抗感程度不同的品系卡红和蜜宝分别作为抗、感对照，或者根据需要选择与抗、感对照抗性一致的主栽品种作为对照。4.2 菌株的选择原则 作为抗性种质资源鉴定，选择西瓜枯萎病菌0号、1号和2号3个生理小种的混合菌株进行接种；作为品种（系）抗性鉴定，选择与被测品种适合栽培区域一致的优势生理小种的3个菌株。4.3 接种体的准备 DB13/T 17312013 2
4、 按照4.2所述的原则选取接种菌株，将选定的菌株活化后接种到马铃薯葡萄糖培养液中，26 170rpm振荡培养约5d，用血球计数板计数，将不同菌株的分生孢子悬浮液调至相同浓度，取等体积的不同菌株的分生孢子悬浮液混合均匀，用于土壤接种。4.4 种子消毒催芽 用于鉴定的西瓜种子在播种前用5%次氯酸钠消毒10min，清水冲洗干净,置于3032的恒温培养箱中保湿、催芽，待胚芽露白后播种。4.5 接种方法 采用土壤夹心接种法，育苗土为无菌基质（沙子与蛭石按1:1混合后，121高压湿热灭菌45min），先称取50%的基质铺于营养钵底层，再称取30%的基质加入配好的分生孢子悬浮液，土壤接菌浓度为5105个孢子
5、/克土（按照全部基质重量计算），充分混合均匀后铺入营养钵的中间，然后浇水，浇水量为基质重量的25%，待水全部渗入基质后，播种西瓜种子，最后覆土，覆土量为基质总量的20%，每品种4次重复，每重复10株，置于2028、光照强度8000Lux10000Lux，12h光暗交替的温室中培养。4.6 病害调查和数据处理 出苗后10d15d开始发病，感病幼苗顶端呈失水状，子叶和叶片萎蔫，茎基部萎缩、变褐、猝倒、枯死。当感病对照品种的病株率达到80.0%时，开始调查各品种的发病株数，按式1计算病株率。病株率（%）=（病株数/总株数）100(1)5 抗性标准 抗性评价标准如下：a)高抗（HR）：病株率小于等于
6、20%；b)中抗（MR）：病株率 21%50%；c)轻抗（LR）：病株率 51%80%；d)感病（S）：病株率大于 80%。6 评价报告 根据抗性评价结果，参照附录B出具参加鉴定西瓜品种（系）抗性评价报告。DB13/T 17312013 3 A A 附 录 A（规范性附录）西瓜枯萎病苗期抗性鉴定调查表 表A.1 西瓜枯萎病苗期抗性鉴定调查表 品种 重复 总株数 发病株数 病株率（%）1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 DB13/T 17312013 4 B B 附 录 B（规范性附录）西瓜枯萎病苗期抗性鉴定评价报告 B.1 西瓜枯萎病苗期抗性鉴定评价报告 品种（系）名称 编号 样品数量 评价时间 评价方法 鉴定结果 评价人（签字）：审核（签字）：年 月 日 年 月 日 _
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