灌洗法提取小鼠肺泡巨噬细胞及体外培养操作规程TZHYX 003-2025.pdf

1、灌洗法提取小鼠肺泡巨噬细胞及体外培养操作规程TZHYX 003-2025讲解了小鼠肺泡巨噬细胞的提取和体外培养标准化操作流程，详细描述了从无菌准备、细胞收集、细胞培养到质量控制的具体步骤和工艺要求。该文件涵盖了关键术语定义如细胞、巨噬细胞和肺泡巨噬细胞，并列出缩略语包括AM、BAL灌洗液、PBS溶液和EDTA。在仪器和设备部分，指定了超净工作台、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、光学显微镜、移液器、电子天平和细胞培养箱等必需工具。实验材料包括注射器、离心管和细胞培养板。细胞提取过程强调无菌操作，涉及紫外灯照射、高压灭菌耗材和颈椎脱位法处死小鼠，以收集BAL灌洗液并注入含有DMEM完全培养基的

2、离心管中，重复灌洗6次以上。细胞培养步骤要求在特定条件下离心、重悬、换液并调整胎牛血清含量至20%以促进增殖。工艺要求部分探索EDTA含量、成分、温度等因素对细胞数量、质量和纯度的影响，建立评价体系。质量控制包括细胞形态的拍照记录和通过流式细胞术使用CD11c、F4/80标记物检测细胞纯度。文档还提供BAL灌洗液和细胞培养基的详细配方，并对比传统配方的变化。灌洗法提取小鼠肺泡巨噬细胞及体外培养操作规程TZHYX 003-2025适用于从事生物医学研究、细胞生物学实验和转化医学领域的科研人员、技术人员和实验室操作者，特别是在大学、医院和研究机构如天津中医药大学、天津医科大学、天津市人民医院、天津市肿瘤医院、四川大学、南开大学等单位工作的人员。该规程针对需要标准化提取和培养小鼠肺泡巨噬细胞的场景，确保实验的一致性和可重复性，适用于细胞制备、免疫学研究、疾病模型开发和相关临床应用的质量控制过程。