基于高通量测序的农作物基因分型检测技术规程DB43T3250-2025.docx

1、基于高通量测序的农作物基因分型检测技术规程DB43T3250-2025讲解了面向湖南省农业生产实际需求而制定的、具有可操作性和地域适配性的农作物基因分型标准化作业路径。该规程系统构建了从样本采集到基因型判定的全链条技术框架，明确界定了基因型与基因分型的核心概念，规范了叶片与种子两类主要农作物样本的取样原则、分级保存策略（含简单处理、干燥处理和冷冻处理三类场景）及差异化运输要求；细化了DNA提取方法（CTAB法与离心柱法）、DNA完整性与浓度双重质控标准，并严格对标GB/T 35537等国家基础标准设定碱基测序准确率门槛；全面覆盖高通量测序两大主流技术路径联合探针锚定测序法（cPAS）与边合成边

2、测序法（SBS），规定其建库、上机、参数设置等关键操作节点；同时明确了FASTQ原始数据质控流程、序列过滤阈值、比对参考基因组要求以及SNP位点识别与基因型注释的技术逻辑。附录中还提供了DNA电泳图谱判读示例和FASTQ文件结构说明，强化了规程的实践指导性与结果可复现性。整个文件以实验室质量管理体系为支撑，强调水、试剂、耗材的等级控制与无菌操作规范，体现了生物检测领域对数据可靠性、过程可追溯性与生物安全合规性的统一要求。基于高通量测序的农作物基因分型检测技术规程DB43T3250-2025适用于湖南省及气候生态条件相近区域的农作物育种科研单位、种业企业分子育种实验室、农业高校与农科院所的遗传研究平台、第三方农作物基因检测服务机构，以及承担省级品种真实性鉴定、DUS测试、种子纯度分子验证和区域性良种繁育基地质量监控任务的相关技术机构。规程特别适配水稻、油菜、辣椒、茶叶等湖南主栽作物的基因分型需求，亦可为全国其他省级农业标准化组织在制定同类高通量测序技术地方标准时提供方法学参考和质控范式。对从事分子标记辅助选择、全基因组选择育种、种质资源精准鉴评、品种权保护司法鉴定等工作的技术人员，以及需要依据标准化流程开展高通量基因分型项目申报、质量审计与能力验证的专业人员，具有直接应用价值。